細(xì)胞系鑒定錯誤的根源

 　　細(xì)胞系鑒定錯誤的根源
　　大部分的細(xì)胞系在學(xué)術(shù)環(huán)境中被建立，在學(xué)術(shù)環(huán)境下，組織培養(yǎng)通常被認(rèn)為是一種對技能少有要求的技術(shù)，其所用到的必要設(shè)備如流動柜和孵育箱使用起來沒什么限制。在這些情況下，嘗試建立一種新的細(xì)胞系通常會導(dǎo)致交叉污染是不足為怪的。在送至德國的微生物和細(xì)胞培養(yǎng)收藏所的550個個白血病和淋巴瘤細(xì)胞系中，59/395（15%）被初創(chuàng)者送來的細(xì)胞系以及23/155（15%）的二級來源是錯誤的。可以推測大部分二級來源的細(xì)胞系已被交叉污染或被初創(chuàng)者錯誤鑒定。
　　有許多緣由可以引起細(xì)胞培養(yǎng)物錯誤鑒定，每一個實驗室都存在風(fēng)險。或許細(xì)胞錯誤鑒定zui直接的原因就是在常規(guī)操作過程中對細(xì)胞培養(yǎng)容器進(jìn)行了錯誤標(biāo)記。造成這種問題出現(xiàn)的原因有：實驗員的工作負(fù)荷、缺乏注意以及在細(xì)胞操作過程中的分心。
　　培養(yǎng)物的交叉污染以及隨后污染細(xì)胞的過量生長是另一個引起細(xì)胞系錯誤鑒定的常見原因。這種情況發(fā)生的幾率在以下條件會增加：試劑的共用、在再喂養(yǎng)操作時反復(fù)使用相同的試管、在沒有充分分離每一細(xì)胞類型情況下同時對多個培養(yǎng)物進(jìn)行操作。當(dāng)交叉污染發(fā)生時，一種細(xì)胞類型迅速生長而超過另一種，在4-5次細(xì)胞傳代后，一個純的污染細(xì)胞培養(yǎng)物將會形成。
　　在使用其它物種的滋養(yǎng)層（例如小鼠3T3細(xì)胞）來繁殖人類干細(xì)胞或原始細(xì)胞時有意地共培養(yǎng)會導(dǎo)致交叉污染或人類細(xì)胞系過生長。正常情況下，滋養(yǎng)層細(xì)胞處于無增殖狀態(tài)，但只要生長抑制程序不*，它就會不斷繁殖并逐步取代人類細(xì)胞。體細(xì)胞雜交雖不常見但也會發(fā)生，如人類套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系NCEB-1就攜帶了小鼠的七條染色體。
　　異種移植也會導(dǎo)致細(xì)胞系交叉污染和錯誤鑒定，來自異種移植的復(fù)蘇細(xì)胞會被宿主動物細(xì)胞所替代。
　　一般而言，交叉污染zui終的結(jié)果將會是少量適應(yīng)細(xì)胞*且快速的替代。兩個細(xì)胞系不能持續(xù)共存于同一個培養(yǎng)環(huán)境，除非它們是共生關(guān)系，但這種情況據(jù)我們所知還未有報道。一個細(xì)胞群經(jīng)過許多次傳代后還能包含一個穩(wěn)定的混合基因組，*已知的情況是接續(xù)的體細(xì)胞雜交。
　　簡單、經(jīng)濟(jì)的質(zhì)控措施能夠阻止或至少會減少細(xì)胞錯誤鑒定的發(fā)生。由于缺乏重視及未采用質(zhì)控措施導(dǎo)致細(xì)胞錯誤鑒定現(xiàn)象極其普遍。大量質(zhì)控措施的實行以及相應(yīng)文件的適當(dāng)調(diào)整被認(rèn)為是生物制藥領(lǐng)域出現(xiàn)相對較低細(xì)胞錯誤鑒定報道的因素。